血常规检验是临床诊断以及治疗评估的一项基础手段，其结果的准确程度直接关联到临床决策的可靠程度。检验之前的标本处理环节是对结果质量产生影响的一个关键因素，其中，抗凝标本的混匀以及静置操作特别关键^[1]。抗凝管采集的血液标本要凭借充分混匀来防止血细胞聚集，然而，混匀之后马上检测可能因为局部浓度不均或者气泡干扰致使结果出现偏差，而静置时间过长又可能因血细胞代谢、血小板形态变化等因素对检测值造成影响。当前临床实践里，对于血常规标本在混匀之后到检测之前的静置时间并未形成统一规范，不同实验室甚至同一实验室内部的操作习惯都存在差异^[2]。这种差异有可能致使同类标本的检验结果产生波动，影响结果的可比性以及临床判断的准确程度。系统分析临检前混匀静置时间对血常规各项指标的具体影响，明确适宜的静置时间范围，对于规范检验操作流程、减少潜在误差、提升检验结果的稳定性有关键的实践意义。

1.资料与方法

1.1一般资料

选取2024年1月至12月期间于我院进行健康体检的100例人群的血液样本作为研究对象。其中男性52例、女性48例，年龄20-74岁，均值（40.05±6.88）岁。

纳入标准：（1）受检者临床资料完整；（2）符合血常规检验指征；（3）检验依从性良好；（4）知晓研究并自愿参与。

排除标准：（1）精神异常，无法有效依从检验操作者；（2）黄疸血样、溶血血样、脂血血样者；（3）沟通或认知障碍者；（4）样本质量不合格者。

1.2方法

样本采集环节，受检者需处于空腹状态，以减少饮食因素对血液成分的干扰，随后经肘部静脉 同时采集两管血液，每管4mL，将血液缓慢注入含EDTA-K₂抗凝剂的真空采血管中，每管轻轻颠倒采血管8-10次使抗凝剂与血液充分混匀，避免血细胞聚集或凝血块形成，两管血液分别标记为A管和B管。

样本处理阶段，将两管样本分别进行不同时间的静置处理：A管在充分摇匀后立即置于室温20℃、相对湿度72%的实验环境中，分别静置10分钟和30分钟；B管在相同环境条件下分别静置1小时及2小时，静置期间严格避免样本管受到震动、阳光直射或温度波动，确保静置条件的一致性。检测仪器与试剂准备方面，采用迈瑞CAL-8000血细胞自动分析仪作为检测工具，实验前需按照仪器标准操作规程完成每日校准、空白检测及质控品验证，确保仪器处于正常工作状态，试剂均在有效期内且无浑浊、沉淀等异常现象。具体检测指标包括血小板计数、中性粒细胞、淋巴细胞、血红蛋白、血细胞比容、红细胞计数及白细胞计数共七项，在各样本达到预设静置时间后，将对应样本管充分摇匀，立即插入仪器进样口，由仪器自动完成样本吸取、稀释、裂解及检测，每管样本在每个静置时间点重复检测3次，取平均值作为该时间点的最终结果，以减少单次检测的随机误差，整个检测过程严格控制操作时间，避免样本在检测前再次受到外力干扰。

1.3统计学方法

研究统计学分析严格遵循临床实验数据处理规范，所有检测数据经双人核对后录入Excel表格整理，确保原始数据准确无误。计量资料以均数±标准差（±s）表示，首先采用Shapiro-Wilk检验评估数据正态性，Levene检验验证方差齐性。对于符合正态分布且方差齐的资料，多组间比较采用单因素方差分析（One-way ANOVA），组内两两比较使用LSD-t检验；若数据不符合正态分布或方差不齐，则采用Kruskal-Wallis H检验进行组间比较。统计分析全程使用SPSS 26.0软件完成，以P<0.05为差异具有统计学意义，所有检验均为双侧检验，确保结果的可靠性与科学性。

2.结果

2.1 不同混匀静置时间样本血常规结果比较

不同混匀静置时间样本血常规结果比较显示，血小板计数中，静置1 h、2 h的样本水平高于静置10 min、30 min样本（P<0.05）；中性粒细胞中，静置1 h、2 h的样本水平低于静置10 min、30 min样本（P<0.05）；淋巴细胞、血红蛋白、血细胞比容、红细胞计数、白细胞计数水平差异无统计学意义（P>0.05）。见表1。

表1 同混匀静置时间样本血常规结果比较

注：*表示与静置30 min同指标数据比较P<0.05；×表示与静置10 min同指标数据比较P<0.05。

3.讨论

血常规标本临检前的检测特点主要呈现在抗凝处理、时效性要求、操作规范性以及标本异质性等多个方面。这些特点共同构建起检验前质量控制的关键部分。血常规标本作为临床最为基础的检验项目，需要依靠EDTA - K₂抗凝剂来维持离体后血细胞形态的稳定^[3]。抗凝剂与血液充分混匀是保证检测准确的必要条件。过度混匀可能致使红细胞膜受损或者血小板发生机械性破碎，而混匀不充分则容易引发血小板聚集、红细胞出现缗钱状排列，直接干扰细胞计数与分类结果。标本的时效性限制非常明显^[4-5]。血液离体后，中性粒细胞会因为能量代谢逐渐出现核分叶模糊的情况，血小板则有可能因为环境温度、pH值的变化而发生活化聚集。这些动态变化要求临检前处理要在特定的时间窗口内完成，以此减少细胞自然衰变对结果产生的影响^[6-7]。操作规范性是临检前质量控制的关键保障。从采血时防止组织液混入、气泡产生，到混匀时严格把控颠倒次数，再到静置时保持环境温度与湿度稳定，每个环节的细微偏差都有可能成为系统误差的源头。另外，标本的个体异质性加大了处理难度^[8]。不同患者的血液黏稠度、细胞脆性存在差异。比如，高脂血症患者的标本容易出现乳糜颗粒干扰血红蛋白检测，贫血患者红细胞体积偏小可能会影响血细胞比容计算^[9]。这些差异要求临检前处理既要遵循标准化流程，又要关注特殊标本的个体化处理需求。

本研究结果显示：不同混匀静置时间样本血常规结果比较显示，血小板计数中，静置1 h、2 h的样本水平高于静置10 min、30 min样本（P<0.05）；中性粒细胞中，静置1 h、2 h的样本水平低于静置10 min、30 min样本（P<0.05）；淋巴细胞、血红蛋白、血细胞比容、红细胞计数、白细胞计数水平差异无统计学意义（P>0.05）。对于血小板计数来讲，静置1小时、2小时的样本水平要高于静置10分钟、30分钟的样本。其核心原因是血小板存在聚集 - 解聚动态平衡过程。EDTA - K₂是血常规检测常用的抗凝剂，它借助螯合钙离子来抑制血小板聚集，不过这种作用有时间依赖性。样本刚混匀后，部分血小板或许因采血时的机械刺激或者抗凝剂初始作用不充分，依旧处于可逆性聚集状态，形成的血小板聚集体直径较大，在血细胞分析仪计数时容易被误判为非血小板颗粒，致使实际计数偏低^[10-11]。随着静置时间延长，抗凝剂与血小板表面糖蛋白受体充分结合，聚集体逐渐解聚成单个血小板，仪器可准确识别并计数，使得血小板水平随着静置时间延长呈现上升趋势^[12]。中性粒细胞水平随着静置时间延长而降低的现象，和细胞代谢以及形态稳定性变化有关。中性粒细胞是外周血中最主要的有核细胞，离体后仍然维持一定的代谢活性，长时间静置会使细胞内ATP消耗增加，胞膜流动性下降，形态逐渐发生改变^[13-14]。血细胞分析仪一般依据细胞体积、细胞核复杂度等参数进行分类，中性粒细胞形态改变可能让其与其他白细胞的分类阈值重叠，导致仪器把部分中性粒细胞误判为其他细胞类型，造成计数偏低。另外，EDTA抗凝剂可能凭借抑制中性粒细胞的黏附分子表达，减弱其与抗凝管内壁的非特异性结合，短时间静置时这种结合尚未完全解除，中性粒细胞相对富集于血浆中，计数偏高，而长时间静置后，细胞均匀分布，结合状态解除，计数趋于真实水平，这也可能是中性粒细胞水平随着静置时间延长降低的另一个原因^[15]。

综上所述，血常规标本临检前混匀静置时间对血小板计数和中性粒细胞等关键指标的检测结果存在显著影响，合理控制静置时间是保障检验准确性的重要环节。临床实践中应规范血常规标本临检前混匀后的静置操作，以减少因时间因素导致的检验误差。本研究结果为优化血常规检验前处理流程、提升检验结果可靠性提供了实践依据。

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