近现代中国食品微生物检测的发展
摘要
关键词
食品微生物;检测;发展
正文
引言
近年来,各类食品安全事件频发,引起了全社会的高度重视,因此,将微生物法应用于食品安全监测具有重要意义。致病菌感染是导致我国食品安全问题的重要因素,而对其进行有效治理已成为迫切需要解决的问题。微生物检验是一种能精确测定食品中微生物的方法,能为预防和控制食源性疾病的发生、发展、预防和控制,从而保证食品安全检验工作的成功开展。
一、食品安全检测中微生物检测技术的积极作用
中、大城市的发展,由于食品生产环节的复杂性和供应渠道的多样性,使得从生产到消费的各个环节都存在着安全隐患。若是仅凭科室的设备,根本无法完成这样的任务。常规的食品样品前处理技术繁琐,且所用的仪器和设备成本较高,很难实现对食品安全的全方位检测。因此,在食品安全检验中,微生物检验具有非常重要的作用。随着我国食品安全监测水平的不断提高,微生物检验技术已逐步成为各监管部门重视的一个重要先决条件。尽管存在灵敏度和特异性等问题,但作为食品安全的首要环节,对其进行筛查,可以为相关部门的食品安全监管提供依据,从而保证食品安全。
二、食品微生物检测内容
2.1食品污染程度监测
食物中的细菌总数,即菌落总数,是保证食物及人体饮用水不受污染的重要指标,也是衡量食物污染水平的标准。通过对食物进行专门的加工,在一定的条件下,可以获得每克食物样品中的微生物菌群,从而为食品检验工作者进行准确的检测提供数据支撑。食物中的大肠菌总数。通常,食品检测员在37℃的高温环境下,将大肠杆菌经一日后发酵,生成革兰氏染色阴性的厌氧菌,这类细菌主要分布在人和动物的排泄物中,由此可以直观地反映出畜禽粪便的污染水平,从而准确评估食物的安全。通过检测细菌总数,可以了解食品的卫生状况,及早采取措施进行处理和保鲜,确保食品安全。
2.2食品内的致病菌检测
国家对食品中的微生物含量有非常严格的规定。因此,食品监控人员不仅要对食物中的病原菌进行检测,同时降低误判和漏检的风险。比如,食品检验人员要特别注意食品中的黄金黄色葡萄球菌和蜡样杆菌,如果产品中的产气荚膜杆菌低于106个/g,就有可能引起食物中毒,如果食物中含有108—109个细菌,就会引起食物中毒。另外,沙门氏菌可以通过食物进入人类的肠道,在小肠内繁殖和生长,引起组织炎症,也可以通过淋巴进入血液,引起系统性感染。因此,食品检验工作者必须准确地测定出食物中的病原菌,从而保证食品的卫生和安全性。
三、食品性病原菌免疫学快速检测技术
3.1荧光抗体检测技术
荧光抗体检测(FAT)英文简称 FAT,是一种利用荧光素标记抗体或抗原,然后将其与待测食物样本中的抗体或抗原结合,用荧光显微镜对其进行观测,一般有两种方法,一种是直接法,另一种是间接法。直接方法是将已知的荧光素标记抗血清加入待检测的食物中,然后将其洗涤后,再用荧光显微镜进行观察。而间接法就是将已知的细菌的特异抗体加入待测的食物中,与样品发生反应后进行清洁,然后加入带有荧光标记的二抗体和三抗体。例如,针对沙门氏菌的荧光抗体在700份以上的样品中,其检测效果接近于常规培养,具有便捷、快速等优点,但易受食品样品中非特异荧光的影响,且荧光显微镜成本较高。
3.2免疫酶技术
免疫酶技术(“EIA”),是一种利用酶标识别抗体或抗原,以侦测相应抗原或抗体的方法。目前最常用的是 ELISA法,其原理是将抗原或抗体黏附于固相载体上,再将被酶标记的抗体或抗原包埋于固相载体内,再将酶与底物进行反应,使其在固相载体内发生反应,生成彩色的产物,其数量与所添加的抗原呈正相关,从而实现快速、灵敏、准确的检测。
四、食源性病原菌分子生物学快速检测技术
4.1基因探针技术
基因探针技术是利用生物素、地高辛等对已知序列进行标记的寡聚核苷酸进行检测,其原理是通过分子杂交与靶基因融合形成杂交信号,从而找到目标基因。标记物可分为同位素标记和无同位素标记两种,前者具有很强的特异性,后者可快速检测病原微生物。然而,由于同位素标记易受辐射污染,且核酸探针的半衰期较短,因此需采取相应的安全措施,以降低其对人体的危害。同时还会受到紫外线照射容易分解等因素的影响,在使用的时候会有一定的局限性。而非同位素标记则能较好地解决这一问题。
4.2聚合酶链反应技术
聚合酶链式反应(“PCR技术”)是一种通过高温变性,低温退火,延长温度来加速目标 DNA的扩增的方法。PCR最大的优点在于,它可以将目标基因或 DNA片段放大,放大到几十万、上百万倍,从而让食物检验人员可以用肉眼直接观察。这种方法不但能够缩短食物的检验时间,而且也能够适当地对核酸探针中的问题进行处理,具有非常明显的高灵敏度,操作简便,方便快捷的优势。因此,这种技术在食品安全测试中的运用非常频繁,例如对粮食、食品等的安全性进行检验,可以很快地发现食物中有没有致病微生物。
4.3生物芯片技术
生物芯片技术被称之为DNA微阵列,它是一种基于 DNA芯片的微流控芯片。即通过对食物样品中的核酸片段进行识别,使其在一定的条件下与其所携带的核酸分子发生交叉反应,从而实现对食物样品中核酸的识别。这一方法本身就是一种高度集成的反向点杂交技术,能够在某种程度上弥补常规核酸检测方法的缺陷。但是,由于其芯片制作复杂、样品制备和识别难度大等问题,目前还没有大规模推广,其发展潜力很大。
五、食品微生物检测的质量管理控制策略
5.1优化检测方法
在食品微生物学研究中,对检测方法进行优化一直是一个不断进行的研究,涉及许多因素与技术。要提高分析的精度与效率,就需要对各种食物的性质及其所携带的微生物进行全面地了解。比如,对于高蛋白食物,如肉类和奶制品,某些细菌,如沙门氏菌,李斯特菌属等,都有可能成为污染的主要危险因素。因此,利用 PCR等分子生物学技术对其进行快速、准确的检测是可行的;果蔬等农产品表面存在细菌、真菌、病毒等多种微生物,在食品加工过程中往往会产生大量的细菌、真菌、病毒等微生物,因此,必须建立更加完善的检测手段,例如免疫学、生化等。因此,在确定测试手段的同时,不断地优化、完善测试方法,也是非常重要的。近年来,由于科技的进步,各种新的分析方法、新技术的出现,使微生物的检测有了更多的选择余地。要跟上时代的步伐,就必须主动地参加有关的研讨会、培训班,与同事们进行深度的沟通与协作,在平时的工作中,主动地发现存在的问题与缺陷,给出改善的意见,同时还要参与到新的开发与实施之中。在此基础上,对已有的分析方法进行进一步的改进与优化,提升其分析精度与效率,从而更好地保证食品安全。
5.2建立实验室质量管理体系
(1)建立严密的实验室管理制度,这是建立健全实验室管理制度的出发点;这些规定包括实验室的日常操作,人员的管理,安全的保护,废物的处置等。尤其是在实验室的卫生与安全方面,检验机构的规章制度应该有具体的规定,例如,定期的清洗和消毒的次数、方法和责任人,温湿度的控制幅度,外来的人员出入管理等。为建立稳定的、无公害的试验环境奠定了基础。
(2) 制定标准作业规程(SOP),这是检验机构质量控制系统的一个重要组成部分。标准程序中,应明确各检测环节的工作流程及注意事项,包括样品采集、预处理、检测程序、结果判断及报告撰写等。通过建立标准作业程序,使检验人员能够按照统一的规范进行作业,降低人为差错。
(3) 对仪器进行周期性的维修与检定/校准,是确保测试仪器精度与可靠性的重要手段。测试仪器是实验室最宝贵的资源,它的工作状况对测试结果的准确与否有很大的影响。为此,要对仪器设备的购置、使用、维护、校验等情况进行记录。
5.3 强化对员工的训练与管理
在食品微生物检验中,检验人员的职业素养与业务水平,对检验结果的准确、可靠程度有很大的影响。所以,要提高检验质量,必须强化人才的培养与管理。对检验人员进行定期的业务培训与评估,是检验人员业务素质、业务水平的一种行之有效的方法。为此,在培养目标、培养内容、培养方式、培养时间等方面,要有系统、有针对性地进行培养。在培养过程中,一方面要掌握食品微生物的基本知识,测试方法与原理,以及设备的使用与维护;在培训方法上,应采取多种形式,如内部培训,参加校外培训班,邀请专家授课或实地授课等。通过培训,检验人员能够不断地进行知识的更新和技术的提升,使其能够更好地从事检验工作。结语
文章从质量控制的角度,对食品微生物检验的整个过程作了详细的论述。在分析目前我国食品微生物检验存在的问题及面临的挑战后,有针对性地提出了解决问题的对策。通过以上研究,可以有效地提升我国食品微生物检验技术的总体水平,为食品安全生产提供强有力的支撑。今后,有关部门要加大对该领域的研究力度,使其不断进步。
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